ABSTRACT
RESUMEN. El arroz, luego del trigo, es el cereal más importante del mundo, sin embargo, es susceptible al ataque de numerosos patógenos, siendo Pyricularia grisea, el más dañino. Este trabajo estableció un sistema de selección in vitro de variedades venezolanas a P. grisea, optimizando el sistema de regeneración por embriogénesis somática (inducción, regeneración y estrés por desecación), sometiendo el callo embriogénico (E) a presión de selección del filtrado crudo "FC" a través de cambios a la misma concentración "MC" o por incrementos progresivos en la concentración "IPC", obteniendo plantas tolerantes al fitopatógeno. El máximo porcentaje de inducción de callo embriogénico oscilo entre 30-65 %, en las cuatro variedades (Araure-4 y Venezuela 21: 1 mg.L-1 + 2 mg.L-1 K; Cimarrón: 3 mg.L-1 + 2 mg.L-1 K; Centauro: 1 mg.L-1 + 2 mg.L-1 BAP), mientras que la regeneración estuvo entre 44 y 52 % con 0.5 mg.L-1 + 2 mg.L-1 BAP a 48 h de desecación para Centauro y 24 h para las otras tres variedades. La frecuencia regenerativa de los callos E disminuyo a medida que se incrementó la concentración del FC, independientemente del método de presión selectiva. El promedio de plantas diferenciada por variedad, dependió del método de presión usado, siendo el sistema IPC (25 % para Centauro y 50 % para las otras tres variedades) el que mostro los resultados más favorables, evidenciándose que para las condiciones de los sistemas selectivos de FC evaluados, la resistencia expresada a nivel de planta in vivo no corresponde a la encontrada in vitro.
ABSTRACT. Rice after wheat is the most important cereal in the world, however, it is susceptible to attack by many pathogens, which Pyricularia grisea being the most harmful. In the current study we established an in-vitro selection system of P. grisea on Venezuelan rice varieties. A somatic embryogenesis regeneration system was optimized (induction, regeneration and desiccation) to expose embryogenic callus (E) to crude filtrate "CF" selection pressure through changes at the same concentration "SC" or progressive concentration increments " PIC "of P. grisea, and thus obtain plants tolerant to the pathogen. The maximum percentage of embryogenic callus induction ranged between 30-65 % in the four varieties (Araure-4 and Venezuela- 21: 1 mg.L-1 + 2 mg.L-1 K; Cimarron: 3 mg.L-1 mg.L-1 + 2 K; Centauro: 1 mg.L-1 + 2 mg.L-1 BAP) while regeneration was between 44 and 52 % with 0.5 mg.L-1 + 2 mg.L- 1 BAP 48 h of desiccation for Centauro and 24 h for the other three varieties. The regeneration frequency of embryogenic callus decreased as the concentration of FC increased, regardless of the method of selective pressure. The average differentiated plants per variety, depended on the pressure method used, with the PIC system being the most favorable (25 % for Centauro and 50 % for the other three varieties). The result demonstrated, to resistance expressed for plants in vivo does not correspond to the in vitro conditions
ABSTRACT
El conocimiento pleno de los promotores determina el éxito en la obtención de nuevos cultivares de plantas a través de técnicas biotecnológicas, ya que dicha secuencia del ADN regula la transcripción de otras regiones adyacentes o cercanas, encontrándose los siguientes promotores: constitutivos, tejido-específicos o estadio-específicos, inducibles y sintéticos. En esta revisión se resume de manera precisa los conceptos, ventajas y limitaciones de los distintos tipos de promotores, con ejemplos claros de ello.
Full knowledge of promoters determines success in obtaining new plant cultivars through biotechnology techniques. This DNA sequence regulates the transcription of adjacent or nearby regions, which are mainly constitutive, tissue-specific or stage-specific, inducible and synthetic. This review summarizes the precise concepts, advantages and limitations of different types of promoters, including clear examples of them.
ABSTRACT
Azadirachta indica, también conocida como neem, es una especie arbórea leñosa perteneciente a la familia Meliaceae, de gran importancia en diversas disciplinas científicas, tales como la forestal y la médico-farmacéutica. Se estableció un método para la propagación in vitro de esta planta, evaluándose como explantes, secciones foliares de vitro-plantas, cotiledones y esquejes. Se emplearon medios semisólidos con combinaciones variables de la citocinina 6-benzylaminopurina (BAP) y las auxinas ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) y ácido indolacético (AIA). Se observó la formación de callo regenerativo, a partir del cual se generó embriogénesis somática primaria y secundaria, mediante los reguladores de crecimiento BAP (1,0 mg.L-1) y 2,4-D (0,2 mg.L-1), mientras que la formación de callo no regenerativo fue promovida por concentraciones mayores a 0,3 mg.L-1 de 2,4-D. De los explantes evaluados, la mayor frecuencia de regeneración de plantas (~67 %) se presentó con secciones cotiledonares.
Azadirachta indica, also known as neem, is a woody tree species belonging to the Meliaceae family, of great importance in various scientific disciplines, such as forestry, medicinal and pharmacist. It was established a method for in vitro propagation of this plant, evaluating explants as leaf sections of vitro-plants, cotyledons and stem cuttings, using semi-solid medium with various combinations of cytokinin 6-benzylaminopurine (BAP) and auxins 2,4-dicholorophenoxyacetic acid (2,4-D) and indol-3-acetic acid (IAA). Regenerative callus formation was observed, from which primary and secondary somatic embryogenesis was generated by growth regulators BAP (1.0 mg.L-1) and 2,4-D (0.2 mg.L-1), whereas non-regenerative callus formation was promoted by concentrations higher than 0,3 mg.L-1 of 2,4-D. Between the used explants, the highest frequency of plant regeneration (~ 67%) presented from cotyledon sections.
ABSTRACT
Azadirachta indica, es una planta con múltiples aplicaciones tanto forestal como farmacológica. Por ende, el establecimiento del sistema de cultivo in vitro por embriogénesis somática ofrece diversas y variadas ventajas, tales como obtener plantas altamente productivas en metabolitos. En este estudio, se utilizaron secciones foliares y cotiledonares, inducidas en medios MS (1962) suplementados con: BAP sólo y combinado con ANA / 2,4-D, TDZ sólo y con ABA. La regeneración fue con MS sólo o con K + AIA y BAP + AIA. Como resultado se estableció un sistema eficiente con secciones de cotiledones, observándose organogénesis a bajas concentraciones de BAP, mientras a altos niveles de BAP (2,5 mg.L-1), así como con TDZ + ABA (0,02 + 1 mg.L-1) respectivamente favorecieron la embriogénesis somática primaria y secundaria en un 96 % y 71 % respectivamente. La regeneración fue 71 % con MS, mientras que el enraizamiento fue de 86,67 % con MS½, obteniéndose plantas completas a corto plazo.
Azadirachta indica, is a plant with multiple forest and pharmacological application. Therefore, the establishment of in vitro culture system for somatic embryogenesis offers several distinct advantages such as obtaining highly productive plant metabolites. In this study, were used sections cotyledon and leaf, induced on MS medium (1962) supplemented with: BAP alone and combined with NAA / 2,4-D, TDZ alone and ABA. Regeneration was with MS alone or with K + BAP + IAA and IAA. As a result was established an efficient system with cotyledon sections, being observed organogenesis at low concentrations of BAP, while high levels of BAP (2.5 mg.L-1) with 96 % and TDZ + ABA (0.02 + 1 mg.L-1) with 71 %, favoring the primary and secondary somatic embryogenesis. Regeneration was 71 % with MS; rooting was 86.67 % with MS½, presenting whole plants obtained short term.
ABSTRACT
La zabila es una planta de gran interés médico-farmacéutico, por las diversas y numerosas propiedades medicinales en enfermedades de distinto origen, corroborándose el efecto de sus extractos en estudios in vitro e in vivo. Se evaluó mediante el método de macro dilución, la actividad antimicrobiana del extracto etanólico foliar del Aloe vera L. (5% a 80%), cualitativamente por la turbidez del cultivo en medio líquido y cuantittivamente en unidades formadoras de colonia (UFC) en medio sólido, determinando la concentración mínima inhibitoria (CMI), bactericida (CMB) y fungicida (CMF) en 50 μL del inoculo de microorganismos de interés clínico, tales como: complejo Candida albicans, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa y Staphylococcus aureus a 37ºC a 24 y 48 h. A las 24 horas, la CMI fue 35, 40 y 55% y la CMB fue 40, 45 y 60%, para E. coli, P. aeruginosa y S. aureus respectivamente, mientras que en C. albicans, la CMI y CMF fueron 55 y 60% respectivamente. A las 48 horas de cultivo la CMI fue 30, 35 y 25% y la CMB fue 35, 40 y 30%, para E. coli, P. aeruginosa y S. aureus, respectivamente, mientras que en C. albicans, la CMI y CMF fueron 40 y 45% respectivamente. Los resultados encontrados con la exposición a 48 h al extracto foliar de Aloe vera L. de estos microrganismos, permite concluir que los mismos son erradicados, planteándose a futuro como una eficaz y económica alternativa natural para el tratamiento de las afecciones causadas por estos organismos tan importantes clínicamente, luego que se realicen las validaciones legales in vivo, que permitan su definitivo uso comercial.
The zabila is a plant of great medical and pharmaceutical interest, for its various and numerous medicinal properties in diseases of different origin, corroborating the effect in vitro and in vivo of extracts. This study evaluated the antimicrobial activity with macro dilution method, in the ethanol extract of Aloe vera leaf (5-80%), qualitatively by the turbidity of the culture in liquid medium and quantitatively in colony forming units (CFU) on solid medium, determining the minimum inhibitory concentration (MIC), bactericidal (BIC) and fungicidal (FIC), in 50 uL of the inoculum of microorganisms of clinical interest such as Candida albicans complex, Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus at 37°C for 24 and 48 h. Found that at 24 hours, MIC was 35, 40 and 55% and BIC was 40, 45 and 60% for E. coli, P. aeruginosa and S. aureus, respectively, whereas C. albicans, the MIC and MFC were 55 and 60% respectively. After 48 hours of culture MIC was 30, 35 and 25% and BIC was 35, 40 and 30% for E. coli, P. aeruginosa and S. aureus, respectively, whereas C. albicans, the MIC and MFC were 40 and 45% respectively. The 48 h exposure to the leaf extract of Aloe vera L has great potential biocide for these clinically important microorganisms, can be effectively used in the production of generic drugs of low economic value to treat conditions caused by them in the future, once the legal validation in vivo, allowing their final commercial use are made.
ABSTRACT
El Neem es una planta de interés etnobotánico, por las potenciales propiedades medicinales, en enfermedades de distinto origen, corroborándose el efecto de sus extractos en estudios in vitro e in vivo. Se evaluó la actividad antimicrobiana del extracto etanólico foliar del Neem (5-80%), cualitativamente por la turbidez del cultivo en medio líquido y cuantitativamente en unidades formadoras de colonia (UFC) en medio sólido, determinando la concentración mínima inhibitoria (CMI), bactericida (CMB) y fungicida (CMF) en 50 μl del inoculo de microorganismos de interés clínico a 37ºC a 24 y 48 h. Las cepas evaluadas fueron el complejo Candida albicans, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus y Streptococcus mutans. Encontrándose a las 24 horas, una CMI de 30, 40 y 45% y una CMB de 35, 45 y 50%, para S. aureus, S. mutans y P. aeruginosa, respectivamente, mientras que en el complejo C. albicans, no se detectó efecto fungicida pero si fungistático parcial. A las 48 horas de exposición S. mutans no creció a ninguna concentración, considerándose la CMB 5%, mientras que la CMI para S. aureus fue de 25%, para el complejo C. albicans de 30% y en P. aeruginosa de 35%, en tanto que la CMB para S. aureus fue de 30%, en P. aeruginosa de 40% y la CMF para el complejo C. albicans fue a 35%. El mayor tiempo de exposición del extracto a bajas concentraciones, tiene un gran potencial biocida para estos microorganismos tan importantes clínicamente, lo que sugiere la posibilidad de utilizarlo para el tratamiento tópico de afecciones causadas por los mismos.
Neem is a plant of ethnobotanical interest, for its medicinal properties in diseases of different origin, corroborating the effect in vitro and in vivo of extracts. This study evaluated the antimicrobial activity, in the ethanol extract of neem leaf (5-80%), qualitatively by the turbidity of the culture in liquid medium and quantitatively in colony forming units (CFU) on solid medium, determining the minimum inhibitory concentration (MIC), bactericidal (BIC) and fungicidal (FIC), in 50 ul of the inoculum of microorganisms of clinical interest at 37°C at 24 and 48 h: The strains tested were complex Candida albicans, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus and Streptococcus mutans. Found that at 24 hours, MIC was 30, 40 and 45% and BIC was 35, 45 and 50% for S. aureus, S. mutans and P. aeruginosa, respectively, whereas to complex Candida albicans not detected fungicidal but fungistatic partial. After 48 hours of culture S. mutans did not grow at any concentration, 5% considered bactericidal, while 25% for S. aureus, 30% in complex Candida albicans and 35% P. aeruginosa were MIC, being 30 and 40% for S. aureus and P. aeruginosa were BIC respectively and fungicidal for C. albicans was 35%. The longer exposure to low concentrations of the extract, has great potential as a biocide for these clinically important microorganisms, can be effectively used in the production of generic drugs of low economic value to treat conditions caused by them.
ABSTRACT
El Aloe vera L. es una planta de la familia Asphodelaceae usada de manera empírica desde hace más de 4000 años, para múltiples usos medicinales. En 1936, se publica la primera aplicación medicinal, lo que marca el inicio de su estudio científico riguroso, validando acciones farmacológicas antimicrobiana, antiinflamatoria, antioxidante y efectos cicatrizante, protector gástrico, antineoplásico, hipoglucemiante y hepatoprotector, entre otros. Por su acción antibacteriana, antiinflamatoria y cicatrizante se ha investigado su uso en el tratamiento de la enfermedad periodontal; en la prevención de gingivitis, caries dental y mucositis; así como en la formación de puente dentinario, en la regeneración de tejido óseo y mucoso, y en patologías como la fibrosis múltiple y el liquen plano bucal, entre otros. Esta revisión bibliográfica presenta una breve descripción botánica y de la composición química de la planta, así como de sus acciones farmacológicas, con énfasis en su aplicación Odontológica, donde las investigaciones en esta área son escasas, además de no contar en Venezuela con productos para tal fin. Su uso como biomaterial puede ser una alternativa a los fármacos convencionales en el tratamiento de la enfermedad periodontal de alta prevalencia mundial, en la pulpectomía, así como cicatrizante post exodoncia y en la prevención de caries dental, gingivitis y mucositis, basado en los resultados de las investigaciones reseñadas.
Aloe vera L: is a plant of the family Asphodelaceae, which is used in herbal medicine empirically for more than 4000 years ago, because of its many medicinal uses. The first research of its medicinal use was in 1936, where he began his rigorous scientific study, validating their pharmacological actions antimicrobial, anti-inflammatory, antioxidant and healing effects, gastric protection, anticancer, hypoglycemic and hepatoprotective. By its antibacterial action, anti-inflammatory and healing was investigated for use in the treatment of periodontal disease in the prevention of gingivitis, dental caries and mucositis; in dentinal bridge formation, and the regeneration of bone tissue and mucosal and in diseases such as multiple fibrosis and oral lichen planus, among others. Thus, this article presents an literature review with a This literature review provides a brief botanical description and chemical composition of the plant, and its pharmacological actions, with emphasis on its application Dentistry, besides not having to Venezuela with products such end. Its use as a biomaterial can be an alternative to conventional treatment of periodontal disease highly prevalent worldwide in pulpotomy and post extraction healing and prevention of dental caries, gingivitis and mucositis based on research results outlined.
ABSTRACT
Los hifomicetos acuáticos son hongos imperfectos microscópicos y en el ecosistema acuático son los responsables de utilizar, degradar y modificar el material vegetal que cae al agua, permitiendo así que el mismo sea utilizado por otros organismos presentes. Si bien este grupo de hongos tiene una amplia distribución geográfica, son pocos los estudios realizados en Venezuela sobre ellos; por lo tanto, se consideró realizar el registro mensual de las especies de hifomicetos presentes en tres ríos de la Cordillera de La Costa (Río Cabriales, Río Cúpira y Quebrada Tócome). Los resultados indican que la flora de hifomicetos acuáticos es variada en cada río y la misma fluctuó en número de especies durante el estudio; sin embargo, no se observó una tendencia estacional durante el año.
Aquatic hyphomycetes are microscopic imperfect fungi and are the principal decomposers of the submerged organic matter in rivers. Consequently, they are involved in the cycling of nutrients and energy provision at the first trophic level of the lotic system. Although this group of fungi have an ample geographic distribution, few studies have been performed in Venezuela. Therefore, a monthly registry of the hyphomycetes species in three rivers of the Mountain Coast (Cabriales River, Cúpira River and Quebrada Tócome) was carried out. The results indicate that the flora of aquatic hyphomycetes is varied in each river and the same fluctuated in number of species during the study, nevertheless, a seasonal tendency was not observed during the year.
Os hyphomycetes aquáticos são fungos imperfeitos microscópicos e os degradadoes principais da matéria orgânica submersa nos rios, conseqüentemente são envolvidos na ciclagem dos nutrientes e da provisão da energia no primeiro nível trófico do sistema lótico. Pese que este grupo de fungos é de ampla distribuição geográfica, em Venezuela poucos estudos foram realizados, conseqüentemente, considerouse realizar o registro mensal das espécies de hyphomycetes em três rios da costa da montanha (Rio de Cabriales, Rio Cúpira e Quebrada Tócome). Os resultados indicam que a flora de hyphomycetes aquáticos foi variada em cada rio, e a mesma flutuou no número de espécie durante o estudo, não obstante, uma tendência estacional não foi observada durante o ano.
ABSTRACT
Diferentes métodos de colección de muestras fueron evaluados para caracterizar mensualmente la biodiversidad de hifomicetos acuáticos en el Río Cúpira sector La Cumaca (Municipio San Diego, Estado Carabobo, Venezuela). La identificación de las especies de hongos acuáticos se realizó por examen de muestras de espuma natural (blanca o amarilla), de espuma artificial e incubación de hojas tomadas al azar. Se encontró que la diversidad de hifomicetos acuáticos variaba con el método de colección de muestra, evidenciándose el mayor número de especies al utilizar espuma natural. Con la espuma blanca fueron reportadas 41 especies, 30 con la amarilla, 19 en espuma artificial y 12 especies con el método de incubación de hojas. Las especies más abundantes y comunes en todos los sistemas de colección de muestra fueron: Alatospora acuminata, Anguillospora longissima, Campylospora sp., Clavatospora tentacula, Flagellospora curvula, Heliscus submersus, Lunulospora cymbiformis, y Triscelophorus monosporus.
Different sampling methods were evaluated for a monthly characterization of aquatic hyphomycetes biodiversity in the Cupira river (La Cumaca sector, San Diego municipality, Carabobo state, Venezuela). Species were identified in natural foam samples (white or yellow), artificial foam and by incubation of randomly collected leaves. Diversity varied with the sampling method, the greater number of species being found in natural foam, with 41 species reported from white natural foam and 30 from yellow natural foam. In artificial foam, 19 species were reported, and in incubated leaves, 12 species. The most abundant and common species in all the sampling methods were: Alatospora acuminata, Anguillospora longissima, Campylospora sp., Clavatospora tentacula, Flagellospora curvula, Heliscus submersus, Lunulospora cymbiformis and Triscelophorus monosporus.
Diferentes métodos da coleção da amostra foram avaliados para caracterização mensal da biodiversidade dos hyphomycetes aquáticos da "La Cumaca" no Río Cúpira (Municipalidade de San Diego, estado de Carabobo). A identificação da espécie destes fungos foi realizada das amostras da espuma naturai (branca ou amarela), da espuma artificial e da incubação aleatòria das folhas coletadas. A diversidade dos hyphomycetes aquáticos variou com o método de coleção da amostra; o maior número de espécies foi com espuma natural, com 41 espécies com espuma branca e 30 com espuma amarela. No segundo lugar foi para a espuma artificial com 19 espécies, seguido pela incubação aleatòria das folhas coletadas com 12 espécies. As espécies mais abundantes e mais comuns em todos os métodos de coleção da amostra foram: Alatospora acuminata, Anguillospora longissima, Campylospora sp., Clavatospora tentacula, Flagellospora curvula, Heliscus submersus, Lunulospora cymbiformis e Triscelophorus monosporus.
ABSTRACT
Two methods were evaluated in order to assess the viability of protoplasts and cell suspensions of Coffea arabica cv. Catimor used in a protocol of transformation by electroporation. One method consisted of staining with 1 percent Evans blue and the other staining with 1 percent 3-[4,5-dimethyltiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT). When Evans blue was applied to viable cells and protoplasts they either did not stain or acquired a faint blue colour. However, it was difficult to distinguish the non-viable cells in the wide spectrum of clear blue tonalities. In contrast, with the MTT assay only the viable cells and protoplasts reduced this salt to the red coloured formazan; viable and non-viable cells were distinguished more clearly with MTT than with Evans blue. The optimal temperature for the reaction with MTT was 37°C. The time of incubation was shown to be important, since longer times improved the reaction; the highest viability value was obtained after incubation for 120 min.
ABSTRACT
El principal objetivo de esta investigación fue caracterizar y optimizar el desarrollo de embriones somáticos secundarios en café (Coffea arabica cv. Catimor). Adicionalmente, dado que la formación de embriones somáticos primarios es la etapa previa a la diferenciación de embriones somáticos secundarios, se compararon tres métodos para su inducción: 1) medio sólido en dos etapas, primero un medio con 4,5µM de ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D) y 35µM de benciladenina (BA), y luego un medio con 4,3µM de ácido naftalenoacético, 2) medio sólido con 4,4-53,3µM BA en una etapa, y 3) cultivos en suspensión. En este último tratamiento el callo se formó en dos etapas de medio sólido, un medio con 9,3µM de cinetina y 2,3µM de 2,4-D y un segundo medio con 22,2µM de BA, así como en un tercer medio líquido con 35µM de BA. Todos los tratamientos indujeron la embriogénesis somática primaria y secundaria. El máximo rendimiento de embriones somáticos primarios se obtuvo en suspensiones celulares. Los embriones somáticos secundarios se diferenciaron directamente a partir de células epidérmicas y subepidérmicas en la zona hipocotilar de los embriones somáticos primarios
Subject(s)
Coffee , Genetics , Seeds , VenezuelaABSTRACT
Se evaluó la sensibilidad de distintos explantes (callo embriogénico, secciones foliares, embriones somáticos en estadio torpedo y células en suspensión) de Coffea arabica cv. Catimor al herbicida glufosinato de amonio (0,5; 1; 5 y 10 mg/L), con el fin de conocer la concentración óptima a utilizar de este agente selectivo en subsiguientes experimentos de transformación genética. Se determinó que, tanto en explantes foliares como en callo y en embriones somáticos, la inhibición del crecimiento se produce a partir de 1 mg/L del herbicida. Las células en suspensión presentaron una mayor resistencia al agente de selección, ya que la concentración inhibitoria del crecimiento fue de 5 mg/L.
Subject(s)
Botany , Coffee/chemistry , Seeds/embryologyABSTRACT
Con el fin de establecer un método de transformación genética para Coffea arabica cv. Catimor, se evaluaron las condiciones óptimas de regeneración y transformación por electroporación en diferentes tejidos de la planta. Se optimizó el sistema de células en suspención, utilizando una sola hormona (BA), obteniéndose altos rendimientos de embriones somáticos primarios y secundarios. Igualmente se estableció el método del MTT (1 por ciento) y las dosis de glufosinato de amomio para la selección de células viables y células potencialmente transformadas (1 mg/L para hoja, callo y embriones somáticos y 5 mg/L para células) respectivamente. Se electroporaron distintos tejidos (calo embriogénico, hojas de vitroplantas, embriones globulares y torpedo), con distintas condiciones, encontrándose el mayor porcentaje de expresión transitoria del gen gus por explante, en tejidos pre-tratados enzimáticamente, a 375 V/cm en callos, y 625 V/cm en hojas y embriones. Los únicos tejidos electroporados que regeneraron plantas, fueron las secciones de embriones somáticos tipo torpedo cultivados en medio líquido, que dieron orígen a embriones somáticos secundarios. Dichos embriones somáticos resultaron positivos en el ensayo histoquímico para el gen gus y en la reacción de PCR para los genes gus y bar